一、基本信息

产品编号：C0016/C0017

核心特点：比色法、细胞膜完整性评估、高灵敏度

产品描述：本试剂盒基于黄递酶催化的碘硝基氯化四氮唑显色反应，通过检测在490nm波长处有特征吸收峰的甲臜产物，实现对乳酸脱氢酶活性的定量分析。该试剂盒专为评估由细胞凋亡或坏死引起的细胞毒性而设计，通过测定从受损细胞释放至培养上清中的LDH活性，可精确反映细胞膜的完整性。同时，该试剂盒亦适用于常规样品中乳酸脱氢酶活性的检测。

二、产品应用

本产品主要用于基于乳酸脱氢酶释放的细胞毒性检测及其他相关研究。

△细胞毒性评估：通过定量检测细胞培养上清中释放的LDH活性，评估化合物、药物或处理条件对细胞的毒性作用。

△细胞膜完整性检测：以LDH释放作为标志物，间接反映细胞膜的破损程度。

△细胞增殖与毒性分析：通过裂解细胞并测定总LDH活性，可用于细胞增殖或细胞毒性实验的平行分析。

△常规酶活测定：适用于检测各类生物样品（如组织匀浆、血清等）中乳酸脱氢酶的活性。

三、产品优势

✅灵敏度高：基于高效的酶偶联显色反应，可检测微量的乳酸脱氢酶活性变化。

✅操作简便：提供即用型或易于配制的试剂组分，实验流程标准化，易于操作。

✅应用广泛：不仅适用于细胞毒性检测，也可用于常规的乳酸脱氢酶活性分析，一盒多用。

✅结果可靠：检测原理成熟，显色信号稳定，重复性好。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样品制备：根据实验目的（检测上清LDH释放或细胞总LDH活性），处理细胞样本并收集待测液。

2. 试剂配制：使用提供的INT稀释液将INT溶液(10X)稀释至1X工作浓度，并按说明书比例混合各组分配制LDH检测工作液。

3. 反应孵育：向样品孔中加入配制好的LDH检测工作液，于避光条件下进行孵育反应。

4. 吸光检测：使用酶标仪或分光光度计，在490nm波长处测定各孔的吸光度值。

5. 数据分析：根据实验设置（如样品对照、细胞自发释放对照、最大释放对照），计算细胞毒性百分比或样品中LDH的酶活力。

五、注意事项

1. 样品保存：待测样品应避免冷冻，以免导致LDH失活。样品制备后建议于4℃保存并于当日完成检测，以确保酶活稳定性。

2. 背景控制：若使用含血清的培养液，必须设立不含细胞但含等量培养液的背景对照孔，以扣除血清中内源性LDH带来的本底信号。

3. 细胞状态：需优化细胞培养条件，避免因细胞过度融合、传代操作不当或环境骤变等因素导致LDH的非特异性释放增加。

4. 绝对定量：如需计算LDH的绝对酶活力单位，用户需另行准备乳酸脱氢酶标准品并绘制标准曲线。

六、相关产品推荐

1. Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)（货号：C0038）：基于WST-8的快速比色法，用于检测细胞增殖与细胞毒性。

2. Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒（货号：C2015S）：通过Calcein-AM (钙黄绿素)和碘化丙啶对活细胞和死细胞进行同步荧光标记与鉴别。

3. Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒（货号：C1062S）：利用膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的特异性结合，用于流式细胞术检测早期细胞凋亡。