一、基本信息
产品名称:Amplex Red琥珀酸检测试剂盒
产品货号:S0529S
规格:100次
保存温度:-20°C避光保存
二、产品介绍
Amplex Red琥珀酸检测试剂盒是一种基于酶耦联反应与Amplex Red荧光探针的检测体系,用于定量测定生物样品中琥珀酸及其盐的含量。该试剂盒通过琥珀酰辅酶A合成酶、丙酮酸激酶及丙酮酸氧化酶的级联反应,将琥珀酸转化为过氧化氢,进而与Amplex Red反应生成荧光产物试卤灵,可通过荧光或吸光度法进行检测。本方法具有高灵敏度、宽线性范围及样品用量少的特点,适用于多种生物样本的分析。
三、产品应用
本试剂盒适用于多种生物样本中琥珀酸含量的定量检测。
△血清/血浆分析:检测人或动物血清、血浆中琥珀酸水平
△细胞代谢研究:分析培养细胞裂解物或上清中的琥珀酸含量
△组织样本检测:测定组织匀浆或裂解液中的琥珀酸浓度
△尿液样本分析:定量尿液中的琥珀酸排泄量
△高通量筛选:适用于自动化操作系统进行大规模样本检测
四、产品优势
✅高灵敏度:荧光检测法可检测低至2μM的琥珀酸,吸光度法检测限为20μM
✅双模式检测:支持荧光和吸光度两种检测方法,可根据实验需求灵活选择
✅宽线性范围:荧光法在2-200μM,吸光度法在20-500μM范围内均具有良好的线性关系
✅样品通用性:配套裂解液适用于细胞、组织及多种体液样本,且与同品牌其他代谢检测试剂盒兼容
✅快速高效:整个检测过程可在约60分钟内完成
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样品制备:根据样本类型(血液、细胞或组织)进行相应处理,获得澄清上清液
2. 反应体系构建:将琥珀酸检测缓冲液、酶溶液、辅助因子、底物及Amplex Red探针按比例混合
3. 加样与孵育:向反应体系中加入标准品或待测样品,于37°C避光孵育30-60分钟
4. 信号检测:使用酶标仪在激发波长571nm/发射波长585nm下检测荧光强度,或在570nm附近检测吸光度
5. 数据分析:根据标准曲线计算样品中琥珀酸的浓度
六、注意事项
1. 探针稳定性:Amplex Red探针对光敏感,开封后需避光保存并尽快使用
2. 还原剂干扰:反应体系中应避免高浓度还原剂(如DTT、β-巯基乙醇),其浓度需低于10μM
3. 反应pH值:确保反应体系pH维持在7-8之间,以保证探针稳定性和检测准确性
4. 样品保存:血清等液体样本短期可于4°C保存不超过2周,长期储存建议-20°C或-80°C
5. 稀释液选择:细胞或组织裂解样品应使用配套裂解液稀释,血液等样品宜使用检测缓冲液稀释
6. 仪器配置:荧光检测需使用黑色或白色不透光96孔板,以降低背景干扰
七、相关产品推荐
1. 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(货号:C0016)
2. 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法)(货号:S0110S)
3. 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法)(货号:S0114S)