一、基本信息

产品名称：Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒

产品货号：C2015S/C2015M/C2015L

规格：100次，500次，2500次

保存温度：-20°C避光保存

二、产品介绍

本试剂盒基于Calcein-AM和碘化丙啶（PI）双荧光染色原理，用于快速、便捷地区分活细胞与死细胞，从而评估细胞活性与细胞毒性。Calcein-AM可被活细胞内的酯酶水解为绿色荧光的Calcein，而PI仅能进入膜完整性受损的死细胞并与核酸结合产生红色荧光。该检测流程约需30分钟，适用于多种细胞类型。

三、产品应用

本Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒适用于多种细胞活性和细胞毒性的检测场景，具体应用包括：

△细胞活性检测：通过双色荧光区分活细胞与死细胞，直观评估细胞群体活力。

△细胞毒性筛选：用于化合物、药物或环境因素对细胞毒性的快速定量与定性分析。

△细胞膜完整性评估：基于PI的染色特性，特异性指示细胞膜损伤程度。

△多类型细胞检测：适用于哺乳动物细胞，并可用于部分植物细胞、酵母及寄生虫细胞的活力分析。

四、产品优势

✅灵敏度高：Calcein-AM在活细胞内经酶促反应产生强绿色荧光信号，PI对死细胞核酸染色信号明确，区分度高。

✅操作便捷：试剂盒提供1000X浓缩储存液及优化的检测缓冲液，工作液配制简单，整个检测流程快速。

✅通用性广：检测缓冲液体系优于常规PBS或HBSS，适用于广泛的哺乳动物及其他类型细胞的检测需求。

✅双色同步：可同时对同一样本中的活细胞（绿色）和死细胞（红色）进行染色与检测，便于结果分析。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 工作液配制：根据检测样本数量，用提供的检测缓冲液稀释Calcein-AM与PI浓缩液，配制新鲜的工作液并混匀。

2. 样本准备：将待测细胞接种于合适的培养板或器皿中，进行所需处理后，用缓冲液轻柔洗涤细胞。

3. 染色孵育：吸弃洗涤液，加入适量Calcein-AM/PI检测工作液，于37°C避光孵育一定时间。

4. 荧光检测：孵育结束后，根据实验设计，立即使用荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测。

5. 数据分析：根据绿色与红色荧光信号，计算细胞存活率或分析细胞毒性效应。

六、注意事项

1. 避光操作：所有荧光染料均存在光淬灭问题，实验全程需注意避光以保持信号稳定性。

2. 试剂保存：Calcein-AM (1000X)对潮湿敏感，建议首次使用时分装并严格密封，于-20°C避光保存。

3. 工作液时效：Calcein-AM检测工作液必须现配现用，配制后请勿冻存，以免染料降解影响染色效果。

4. 干扰因素：细胞培养液中的血清或酚红可能干扰染色，建议在添加工作液前用检测缓冲液洗涤细胞。

5. 用途限定：本产品仅供科学研究使用，不可用于临床诊断、治疗或作为食品药品用途。

6. 个人防护：操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套，遵守实验室安全规范。

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