一、基本信息
产品名称:活性氧检测试剂盒(含稀释液)
产品货号:S0034S/ S0034M
规格:S0034S >100次,S0034M >500次
保存温度:-20°C避光保存
二、产品介绍
本产品为基于荧光探针DCFH-DA的活性氧检测试剂盒,配套提供经优化的探针稀释液与阳性对照稀释液。其原理在于DCFH-DA可被动扩散进入细胞,经细胞内酯酶水解为DCFH并滞留于胞内;DCFH可被细胞内活性氧特异性氧化,生成具有强荧光的DCF。通过检测DCF的荧光强度,即可实现对细胞内活性氧水平的定量或定性分析。试剂盒包含阳性对照试剂Rosup,便于实验体系验证与优化。
三、产品应用
本产品适用于多种细胞样本中活性氧水平的检测。
△细胞氧化应激研究:评估药物、环境胁迫或病理条件下细胞内活性氧的产生与变化。
△信号通路研究:检测与活性氧相关的细胞信号转导事件。
△抗氧化剂筛选:评价化合物或提取物的抗氧化活性。
△细胞凋亡与自噬研究:监测相关生理过程中活性氧的动态变化。
四、产品优势
✅高灵敏度:本底荧光低,检测灵敏度高,具备宽广的线性检测范围。
✅便捷可靠:提供预优化的专用稀释液,简化操作流程,确保检测结果的稳定性和重现性。
✅灵活高效:提供两种包装规格,适配不同通量需求,可广泛应用于微孔板检测、流式细胞术及荧光显微镜观察等多种检测平台。
✅体系完备:内置活性氧诱导剂Rosup作为阳性对照,便于实验条件优化与结果验证。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 探针装载:根据实验设计,确定探针装载与样品刺激的先后顺序。对于短时刺激,建议先装载探针后刺激;对于长时处理,可先刺激细胞后装载探针。
2. 洗涤:探针孵育结束后,使用预温的缓冲液或细胞培养液洗涤细胞,以彻底去除残留于细胞外的未进入探针,降低背景荧光。
3. 检测:将样品置于适当的检测平台。可使用荧光酶标仪或荧光分光光度计进行定量检测,使用流式细胞仪进行单细胞分析,或使用激光共聚焦显微镜进行原位观察与成像。
4. 参数设置:检测时,建议将荧光分光光度计或酶标仪的激发波长设置为488 nm,发射波长设置为525 nm,进行实时或定时检测。
六、注意事项
1. 探针保存:DCFH-DA母液对光敏感,须于-20°C避光保存,稀释后的工作液建议现配现用。
2. 背景控制:探针装载后的洗涤步骤至关重要,必须充分以去除胞外未进入探针,避免产生高背景信号。
3. 装载验证:建议在正式实验前,通过荧光光谱扫描验证探针在细胞内的装载效率与特异性。
4. 对照设置:实验需设置未经处理的阴性对照及使用试剂盒提供的Rosup处理的阳性对照,以确保实验体系有效。
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