一、基本信息
产品名称:Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
产品货号:C1062S / C1062M / C1062L
规格:20次 / 50次 / 100次
保存温度:4°C避光保存,有效期半年;-20°C避光保存,有效期一年
二、产品介绍
本试剂盒基于FITC标记的重组人膜联蛋白V(Annexin V),通过特异性结合细胞凋亡早期外翻至细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸(PS),实现对凋亡细胞的灵敏检测。试剂盒同时提供碘化丙啶(PI)染色液,用于区分晚期凋亡与坏死细胞。该检测体系兼容流式细胞仪、荧光显微镜等多种荧光检测平台。
三、产品应用
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒主要用于细胞凋亡的定性与定量分析。
△流式细胞术分析:对细胞群体进行快速、定量的凋亡率统计。
△荧光显微成像:对贴壁或悬浮细胞进行凋亡形态学观察与定位。
△药物筛选评估:用于评价化合物、药物或处理条件对细胞凋亡的诱导或抑制效应。
△细胞毒性研究:区分凋亡性与坏死性细胞死亡,评估处理方式的毒性机制。
四、产品优势
✅高特异性:Annexin V对磷脂酰丝氨酸具有高度亲和力与钙离子依赖性,能准确识别早期凋亡细胞。
✅双色区分:结合FITC(绿色)与PI(红色)双荧光标记,可同步区分活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞及坏死细胞。
✅操作便捷:提供优化的结合缓冲液,染色步骤简单快速,孵育时间短,适用于高通量筛选。
✅广泛兼容:适用于多种类型的悬浮细胞与贴壁细胞,并可适配于流式细胞仪、荧光显微镜、荧光酶标仪等多种检测设备。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 细胞准备:收集经处理的细胞,用PBS洗涤并重悬,计数调整细胞浓度。
2. 细胞染色:取适量细胞,离心弃上清,用Annexin V结合缓冲液重悬细胞。
3. 探针添加:向细胞悬液中依次加入Annexin V-FITC与PI染色液,轻柔混匀。
4. 避光孵育:室温避光条件下孵育10-20分钟。
5. 上机检测:孵育结束后,尽快使用流式细胞仪或荧光显微镜进行检测分析。
六、注意事项
1. 样品新鲜度:染色后的细胞样品应尽快检测,避免长时间放置导致凋亡进程继续或荧光淬灭。
2. 胰酶处理:若使用胰酶消化贴壁细胞,必须彻底洗涤以去除残留胰酶,防止其降解Annexin V-FITC。
3. 避光操作:所有荧光试剂及染色过程均需严格避光,以维持荧光信号稳定性。
4. 试剂保存:建议将PI染色液分装后于-20°C长期保存,避免反复冻融影响活性。
5. 对照设置:实验需设置未经处理的阴性对照及诱导凋亡的阳性对照,以确保结果可靠性。
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