一、基本信息
产品名称:线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
产品货号:C2006
规格:>100次检测
保存温度:-20℃避光保存,部分组分可4℃保存
二、产品介绍
本试剂盒采用JC-1作为荧光探针,用于灵敏、快速地检测细胞、组织或纯化线粒体的膜电位变化。JC-1在线粒体膜电位较高时于基质内聚集形成聚合物,发射红色荧光;膜电位降低时则以单体形式存在,发射绿色荧光。通过监测红绿荧光强度的比例变化,可有效评估线粒体膜电位水平,是研究细胞早期凋亡及线粒体功能的常用工具。
三、产品应用
本线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)适用于多种基于线粒体膜电位变化的科学研究。
△细胞凋亡早期检测:通过检测线粒体膜电位下降,作为细胞凋亡的早期指标。
△线粒体功能评估:用于评估药物、毒素或病理条件下线粒体的功能状态。
△氧化应激研究:检测活性氧等因子对线粒体膜电位的直接影响。
△细胞活力检测:作为反映细胞健康与代谢状态的参数之一。
四、产品优势
✅双色荧光:JC-1探针的荧光颜色随膜电位高低发生红绿转换,结果直观,可通过荧光比例进行半定量分析。
✅灵敏度高:能够检测到早期、细微的线粒体膜电位变化,适用于凋亡起始阶段的研究。
✅应用广泛:适用于多种样本类型,包括贴壁细胞、悬浮细胞、组织样本及纯化的线粒体。
✅配套完整:试剂盒提供JC-1染色液、缓冲液及阳性对照CCCP,实验体系完备。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 工作液配制:根据样本类型计算所需体积,将JC-1(200X)与超纯水混匀后,再加入JC-1染色缓冲液(5X)稀释至1X工作液。
2. 阳性对照设置:使用试剂盒内CCCP溶液处理细胞,诱导线粒体膜电位下降,作为实验对照。
3. 样本染色:弃去细胞培养液,加入JC-1染色工作液,在细胞培养条件下孵育。
4. 缓冲液洗涤:吸弃染色工作液,使用预冷的1X JC-1染色缓冲液洗涤样本。
5. 荧光检测:使用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,JC-1单体激发/发射波长为490/530 nm,聚合物为525/590 nm。
六、注意事项
1. 储存:JC-1(200X)原液需-20℃避光保存,避免反复冻融,融化时需在20-25℃水浴中进行。
2. 配制顺序:必须先将JC-1(200X)与超纯水充分混合,再加入染色缓冲液(5X),顺序不可颠倒。
3. 洗涤温度:使用预冷(约4℃)的1X染色缓冲液进行洗涤,可获得更佳的背景清除效果。
4. 及时检测:样本完成染色和洗涤后,应在30分钟内完成荧光观测,检测前置于冰上保存。
5. 安全操作:阳性对照试剂CCCP为线粒体抑制剂,对人体有害,操作时需佩戴防护装备,在通风橱中进行。
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