一、基本信息
产品名称:Lipo8000™转染试剂
产品货号:C0533-0.5ml / C0533-1.5ml / C0533-7.5ml
规格:0.5ml / 1.5ml / 5×1.5ml
产品组分:Lipo8000™转染试剂
递送分子类型:质粒DNA,siRNA,RNA,寡核苷酸,核酸蛋白复合物,带负电荷的蛋白
细胞类型:哺乳动物真核细胞(包括贴壁细胞与悬浮细胞)
二、产品概述
Lipo8000™转染试剂是碧云天研发的一款基于纳米材料的高效转染试剂。其操作流程简便,无需孵育步骤,适用于将多种核酸及核酸-蛋白复合物导入真核细胞,亦可用于活体动物的基因递送与治疗研究。
三、产品应用
△基因功能研究:用于将外源性质粒DNA导入细胞,以研究特定基因的过表达效应。
△基因沉默研究:用于将siRNA递送至细胞内,实现靶向基因的敲低,研究其功能缺失表型。
△核酸-蛋白复合物转染:适用于将带负电的蛋白或预组装的核酸-蛋白复合物导入细胞。
△活体动物转染:可用于活体动物水平的核酸递送与基因治疗相关实验。
四、产品优势与特点
✅高效转染:转染效率与国际主流试剂相当,且在部分难转染的细胞系中表现更优。
✅操作简便:无需使用含血清培养基配制转染复合物,且转染混合物可直接混匀使用,省去了孵育步骤。
✅广泛适用:对多种哺乳动物细胞系,尤其是难转染的贴壁细胞,具有良好的适用性。
✅低细胞毒性:转染后通常无需更换培养液,可直接进行后续的细胞收集与蛋白表达分析,简化了实验流程。
五、使用说明(概述)
1. 细胞准备:以六孔板为例,将细胞接种至每孔约20-70万个,待其密度生长至70-80%汇合度。
2. 培养基更换:转染前,为细胞更换新鲜的、含有血清和抗生素的完全培养基。
3. 复合物配制:使用无血清培养基或Opti-MEM® Medium,将质粒DNA与适量Lipo8000™转染试剂轻柔混匀,制备转染复合物。
4. 复合物添加:将上述转染复合物均匀滴加至细胞培养孔中,轻轻摇匀后继续培养,过程中无需更换培养基。
5. 效果检测:转染24-48小时后,可通过荧光观察、Western Blot或ELISA等方法检测转染与表达效果。
六、注意事项
1. 试剂用量:避免过量使用转染试剂,过高的试剂与核酸比例可能导致转染效率下降。
2. 核酸质量:使用高纯度的DNA或RNA样品是获得高转染效率的关键前提。
3. 细胞状态:进行转染的细胞必须处于对数生长期,状态良好。
4. 换液时机:若需换液,可在转染后4-6小时进行,此操作不影响最终转染效率。
5. 自备耗材:实验需用户自备无血清培养基、Opti-MEM®或DMEM等用于配制转染复合物。
6. 试剂处理:本品不可涡旋振荡或离心,应通过轻柔吹打或缓慢颠倒进行混匀。
7. 储存与使用:使用后应立即盖紧瓶盖,避免试剂长时间暴露于空气中;短期保存于4°C,长期不用建议置于-20°C保存。
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