一、基本信息

产品名称：GreenNuc™ 活细胞Caspase-3活性检测试剂盒

产品货号：C1168S / C1168M

规格：20-40次 / 100-200次

保存温度：-20℃避光保存

二、产品介绍

GreenNuc™ 活细胞Caspase-3 活性检测试剂盒是一种基于细胞膜通透性荧光底物的检测工具，用于特异性检测活细胞中凋亡关键执行者Caspase-3/7的酶活性。该试剂盒操作简便，孵育后可直接通过荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行实时、动态的细胞凋亡监测与分析。

三、产品应用

本试剂盒主要用于活细胞中Caspase-3/7活性的检测与细胞凋亡研究。

△细胞凋亡检测：用于实时监测和定量分析活细胞的凋亡进程。

△Caspase-3/7活性分析：特异性检测细胞内Caspase-3和Caspase-7的酶活性变化。

△多参数凋亡研究：可与线粒体膜电位探针等其他荧光染料联用，进行多通路、时空关系的凋亡机制研究。

△形态学观察：在检测酶活性的同时，可观察凋亡过程中细胞核的形态学变化。

四、产品优势

✅活细胞检测：无需裂解细胞，可直接对活细胞进行实时、动态的凋亡过程监测。

✅高特异性：底物为Caspase-3/7特异性识别的DEVD序列，确保检测结果的特异性与可靠性。

✅双功能设计：同时实现Caspase-3/7活性检测与细胞核形态观察，提供更多凋亡信息。

✅操作简便：检测试剂可直接加入培养基，孵育短时间后即可进行观测，流程快速。

✅后续兼容性：染色后的样本可使用多聚甲醛固定，兼容后续的免疫荧光、免疫组化等实验。

✅内置对照：提供可逆抑制剂Ac-DEVD-CHO，便于设立实验对照，确认检测体系的有效性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 实验优化：提前优化细胞密度（建议50%-90%汇合度）、底物工作浓度（推荐5μM，可于1-10μM范围摸索）及抑制剂使用方案。

2. 设立对照：需设立未诱导凋亡的阴性对照、诱导凋亡的阳性对照以及添加抑制剂的诱导凋亡对照。

3. 诱导与加样：采用适当方法诱导细胞凋亡，更换为含有优化后浓度底物的新鲜培养液。

4. 孵育染色：室温避光孵育15-30分钟，使底物进入细胞并被剪切、结合DNA。

5. 检测分析：孵育后可直接或换液后，使用荧光显微镜（Ex/Em: 500/530 nm）、流式细胞仪或荧光酶标仪进行观测与数据分析。

六、注意事项

1. 固定兼容性：本试剂盒染色与多聚甲醛或甲醛固定兼容，但与甲醇固定不兼容。固定时间建议控制在10-15分钟，过长可能影响荧光信号。

2. 荧光淬灭：荧光染料存在光淬灭现象，应避免样本长时间暴露于激发光下。

3. 组分保存：试剂组分需-20℃避光保存，避免反复冻融，建议适当分装使用。

4. 抑制剂溶解：抑制剂Ac-DEVD-CHO在低温下可能凝固，使用前可在20-25℃水浴中短暂温育至完全溶解。

5. 细胞类型限制：请注意，有文献报道在少数细胞类型的凋亡过程中可能检测不到Caspase-3/7的激活。

6. 复染推荐：为清晰观察所有细胞核，推荐使用Hoechst 33342等核染料进行复染。

7. 用途限定：本产品仅限用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗或食品、药品领域。

七、相关产品推荐

1.  Hoechst 33342活细胞染色液(100X)（货号：C1027/C1028/C1029）

2.  免疫染色通透液(Triton X-100)（货号：P0096）