一、基本信息
产品名称:BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒
产品货号:C3206
规格:100ml(包含碱性磷酸酯酶显色缓冲液100ml,BCIP溶液(300X) 350μl,NBT溶液(150X) 700μl)
保存温度:4ºC避光保存
二、产品介绍
本试剂盒是一种基于BCIP/NBT底物系统的显色试剂,用于检测碱性磷酸酯酶的活性。在碱性磷酸酯酶的催化下,底物发生反应生成不溶性的深蓝色至蓝紫色沉淀,适用于多种基于该酶标记的检测体系。
三、产品应用
本BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒主要用于基于碱性磷酸酯酶标记的检测技术显色。
△免疫组织化学:用于组织切片中抗原-抗体复合物的显色检测。
△Western Blot膜显色:用于检测转印膜上经碱性磷酸酯酶标记的蛋白。
△干细胞鉴定:用于诱导多能干细胞等细胞中内源性碱性磷酸酯酶活性的显色鉴定。
△原位杂交检测:用于核酸探针杂交后的显色信号检测。
四、产品优势
✅高灵敏度:底物系统反应生成不溶性有色沉淀,信号对比度高,背景清晰。
✅显色稳定:生成的NBT-formazan沉淀性质稳定,便于结果长期保存与观察。
✅应用广泛:兼容组织、细胞样本及膜检测,适用于多种酶标记实验体系。
✅配方成熟:基于经典的BCIP/NBT底物系统,反应条件温和,结果可靠。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本洗涤:完成一抗或探针孵育后,使用适当缓冲液充分洗涤样本3-5次。
2. 工作液配制:按比例将显色缓冲液、BCIP溶液与NBT溶液混合,配制新鲜染色工作液。
3. 显色孵育:向样本中加入足量工作液,确保完全覆盖,室温避光条件下进行反应。
4. 反应监控:密切观察显色过程,通常在5-30分钟内可观察到颜色变化,直至达到理想强度。
5. 终止反应:移去工作液,使用蒸馏水洗涤样本1-2次以终止酶促反应。
6. 后续处理:根据样本类型,可选择进行复染或晾干保存等后续操作。
六、注意事项
1. 安全防护:BCIP和NBT均对人体有害,操作时必须穿戴实验服与手套,并在通风橱内进行,避免接触或吸入。
2. 产品用途:本品仅限用于科学研究,不可用于临床诊断、治疗或作为食品、药品成分。
3. 保存条件:各组分需于4ºC避光保存,其中BCIP与NBT溶液对光敏感,需特别注意。
4. 工作液配制:显色工作液建议现配现用,并确保按推荐比例精确配制,以获得最佳显色效果。
5. 反应控制:显色反应时间需根据具体实验条件优化,避免过度孵育导致背景过高。
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