一、基本信息
产品名称:SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)
产品货号:P0015A
规格:10ml
保存温度:-20℃
二、产品介绍
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)是一种以溴酚蓝为指示染料的即用型蛋白样品处理试剂。该缓冲液可直接用于裂解细胞或组织样本,处理后的裂解物无需额外处理即可用于常规SDS-PAGE电泳上样,简化了样品制备流程。其设计兼顾了裂解与上样功能,适用于对操作便捷性要求较高的实验场景。
三、产品应用
本SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)主要用于蛋白质样品的制备与电泳上样,具体应用包括:
△蛋白样品裂解:直接用于裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样本。
△SDS-PAGE上样:处理后的样品可直接上样进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。
△样品稀释:用于在SDS-PAGE实验前稀释待上样的蛋白样品。
四、产品优势
✅便捷高效:整合了裂解与上样步骤,简化了蛋白样品的前处理流程。
✅成分安全:含DTT作为还原剂,不含剧毒的β-巯基乙醇,使用相对安全。
✅即用型设计:为1X工作浓度,开瓶后无需稀释即可直接使用。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 溶解:将冻存的缓冲液于室温或不超过37℃的水浴中完全溶解,随后置于室温备用。
2. 细胞裂解(贴壁细胞):吸弃培养液,酌情洗涤细胞后,按比例加入缓冲液,吹打混匀使细胞充分裂解,收集裂解物。
3. 细胞裂解(悬浮细胞):离心收集细胞,重悬弹散后,按比例加入缓冲液,轻弹混匀至无明显细胞沉淀。
4. 组织裂解:将组织剪碎,按比例加入缓冲液,使用玻璃匀浆器或涡旋振荡进行充分匀浆裂解。
5. 热变性:将收集的裂解物于100℃沸水浴中加热5-10分钟,以确保蛋白质充分变性和基因组DNA断裂。
6. 上样准备:样品冷却至室温后,短暂离心取上清,即可直接上样进行SDS-PAGE电泳。
六、注意事项
1. 产品特性:本品含有DTT,有轻微刺激性气味,操作时需在通风良好处进行。
2. 溶解要求:使用前必须确保缓冲液完全溶解并混匀。
3. 浓度测定:经本品裂解得到的蛋白样品无法采用Bradford或BCA法准确定量,上样均一性需通过电泳染色或免疫印迹结果进行验证和调整。
4. 使用限制:本品仅限用于科学研究,不可用于临床、食品、药品等领域。
5. 安全防护:操作时请穿戴实验服与一次性手套,做好个人防护。
6. 加热处理:对于细胞或组织起始量大的样本,若加热后样品仍粘稠,可适当延长加热时间或补加缓冲液后再次加热,以确保样品流动性。
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