一、基本信息
产品名称:3X Flag多肽
产品货号:P9801-1mg / P9801-5mg / P9801-25mg
规格:5mg/ml×0.2ml / 5mg/ml×1ml / 25mg粉末
保存温度:-20℃保存,粉末装(P9801-25mg)可于4℃保存
二、产品介绍
3X Flag多肽是一种含有三组Flag标签核心序列的合成多肽,主要用于通过竞争性洗脱方式,从Anti-Flag抗体或亲和凝胶上温和、高效地释放Flag标签融合蛋白。其C端包含经典的Flag标签序列(DYKDDDDK),能特异性地与Anti-Flag抗体结合,从而在不引入抗体干扰的情况下获得高纯度的靶蛋白洗脱物,适用于下游的Western Blot等分析。
三、产品应用
3X Flag多肽主要用于Flag标签融合蛋白的免疫沉淀洗脱实验。
△竞争性洗脱:用于从Anti-Flag抗体或Anti-Flag亲和凝胶上洗脱结合的Flag融合蛋白。
△非变性纯化:在温和条件下(如TBS缓冲液)进行洗脱,保持目标蛋白的天然构象与活性。
△减少背景干扰:洗脱产物中不含抗体轻链和重链,有效降低后续Western Blot检测的背景信号。
四、产品优势
✅高亲和力:其含有的三组Flag标签核心序列可提供更强的结合力,确保高效的竞争性洗脱。
✅高纯度:产品纯度约98%(HPLC分析),保证了实验结果的可靠性和一致性。
✅操作温和:采用非变性洗脱方法,避免使用强酸或高浓度盐等苛刻条件,有利于维持目标蛋白的生物学活性。
✅兼容性强:适用于基于Anti-Flag抗体的常规免疫沉淀以及Anti-Flag亲和凝胶的纯化流程。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 预处理(粉末装):在开盖前,于8,000-12,000×g离心10-30秒,使粉末聚集于管底。
2. 溶解配制:使用推荐的TBS缓冲液(50mM Tris-HCl, pH7.4, 150mM NaCl)溶解粉末,轻轻摇晃混匀,避免剧烈振荡。
3. 洗脱液制备:将储存液用TBS缓冲液稀释至工作浓度(通常为150μg/ml)。
4. 竞争洗脱:向完成结合的免疫沉淀样品中加入适量洗脱工作液,于冰浴条件下轻柔孵育30分钟至2小时。
5. 收集蛋白:4℃条件下以6,000×g离心30秒,小心吸取上清液,即为洗脱获得的Flag融合蛋白。
六、注意事项
1. 储存分装:溶液状态或粉末溶解后,建议进行小份分装并于-20℃或更低温度保存,避免反复冻融导致多肽活性下降。
2. 使用范围:本产品仅限于科学研究用途,不可用于临床诊断、治疗、食品或药品生产。
3. 操作防护:实验操作过程中,请穿着实验服并佩戴一次性手套,确保实验人员安全。
4. 溶解方法:溶解多肽时请轻柔混匀,避免使用涡旋振荡器等剧烈方式,以防多肽变性失活。
七、相关产品推荐
1. Anti-Flag Affinity Gel (货号:P2271)
2. 3X Flag多肽 (货号:P9801)