一、基本信息

产品名称：DH10B-Plus 电击感受态细胞

产品货号：DE1072

规格：50μl/支，含pUC19对照质粒 (10pg/μl) 10μl

保存温度：-80℃保存，保质期6个月

二、产品介绍

DH10B-Plus电击感受态细胞是经特殊工艺制备的、专用于电击转化的感受态细胞。该菌株在DH10B基础上进行了遗传改造，增强了细胞膜通透性及对瞬时高压的耐受性，从而获得极高的电击转化效率（>2×10¹⁰ cfu/μg pUC19 DNA）。其基因型特点使其特别适合克隆甲基化修饰的DNA、构建大质粒及各类文库。

三、产品应用

DH10B-Plus电击感受态细胞适用于多种分子克隆实验。

△高效克隆：适用于克隆含有甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤修饰的真核或原核基因组DNA片段。

△大质粒构建：适用于构建大型质粒或进行各种文库（如cDNA文库、基因组文库）的构建。

△蓝白斑筛选：携带ϕ80dlacZΔM15标记，可与相应载体配合进行α-互补蓝白斑筛选。

△高纯度提取：recA1和endA1突变有利于外源DNA片段的稳定和高纯度质粒DNA的制备。

四、产品优势

✅高转化效率：经特殊工艺处理，对标准质粒pUC19的转化效率高于2×10¹⁰ cfu/μg DNA。

✅广谱兼容：能够高效转化含有甲基化修饰（如5-甲基胞嘧啶、N6-甲基腺嘌呤）的DNA分子。

✅遗传稳定：recA1突变可减少同源重组，endA1突变可消除核酸内切酶I活性，有利于插入片段稳定和质粒高产量提取。

✅即用型设计：提供包含对照质粒的即用型包装，方便进行转化效率验证和实验对照。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 预热培养基：将SOC培养基置于37℃预热1-2小时。

2. 准备电击杯：将0.1 cm电击杯彻底干燥并预冷。

3. 混合样品：将融化的感受态细胞与目的DNA轻柔混匀。

4. 转移至电击杯：使用处理过的枪头将混合物转移至预冷的电击杯中。

5. 电击转化：使用电转仪在预设参数（1.8 kV， 200 Ω， 25 μF）下进行电击。

6. 复苏培养：电击后立即加入预热的SOC培养基，于37℃振荡复苏60分钟。

7. 涂布培养：离心收集菌体，重悬后涂布于含相应抗生素的SOC平板，37℃过夜培养。

六、注意事项

1. 操作轻柔：混合DNA时应避免剧烈震荡或产生气泡，以保护细胞膜完整性并防止电弧放电。

2. 抗性冲突：该菌株本身具有链霉素和四环素抗性，因此不能用于转化携带这两种抗性标记的质粒。

3. DNA纯度：转化效率对DNA纯度敏感，盐离子、乙醇、蛋白质等污染物会显著降低效率。

4. 大质粒转化：转化大质粒时效率会下降，建议使用高纯度质粒提取试剂盒纯化DNA。

5. 连接产物处理：对于连接产物，建议纯化并控制终浓度（建议≤100 ng/μl）和体积以优化转化效果。

6. 电击杯状态：确保电击杯清洁干燥，残留的乙醇或离子会增加溶液电导率和电弧放电风险。

七、相关产品推荐

1. SOC培养基（货号：CM1014L）

2. TB培养基（货号：CM1018L）