一、基本信息

产品编号：D5005（50反应）/ D5006（200反应）

核心特点：快速转换、高回收率、高兼容性

产品描述：EZ DNA Methylation-Gold Kit在经典亚硫酸氢盐 DNA 转换技术基础上创新使用热变性，使 DNA 双链打开与亚硫酸氢盐转换在同一反应中完成，省去单独变性步骤。该方法可在<3小时内实现>99%的转换效率，并通过 Zymo‑Spin IC 离心柱完成去硫和纯化，回收率可达>75%。获得的单链 DNA 质量高，适合多种下游应用，包括 PCR 扩增、酶切、测序、微阵列及高通量测序文库制备。样品适用范围广，包括经纯化的基因组 DNA、限制酶消化 DNA、线性化质粒 DNA 等（500 pg–2 µg DNA 输入量）。

二、产品应用

EZ DNA Methylation-Gold Kit可对 DNA 进行高效率亚硫酸氢盐转换，适用于：

△ PCR 扩增分析

△ 限制性内切酶消化

△ 测序 (Sequencing)

△ 微阵列分析 (Microarrays)

△ 高通量测序文库构建 (NGS Library Preparation)

适合分析来自各种物种基因组中的 CpG 及非 CpG 甲基化位点。

三、产品优势

✅ 超快速： DNA 变性与亚硫酸氢盐转换在一步中完成，总耗时约3小时。

✅ 高转换效率：转换率≥99%，确保甲基化检测的灵敏度与准确性。

✅ 高回收率：>75% DNA回收，可处理50 bp以上片段。

✅ 样品兼容性强：可处理多种来源的纯化DNA，包括植物、高非CpG甲基化物种样本。

✅ 下游应用广泛：获得DNA可直接用于PCR、测序、芯片与NGS，无需额外处理。

✅ 安全可控：避免过长去硫步骤导致DNA降解，保证产物质量。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样品准备：取500 pg–2 µg高质量、无RNA污染的DNA，加入CT转换试剂及M‑稀释缓冲液（Gold）。

2. 一步转换：在热盖PCR仪中进行DNA热变性及亚硫酸氢盐转换反应（按照说明书程序，耗时约3小时）。

3. 结合与去硫：将反应产物加入结合缓冲液，并转移至Zymo‑Spin IC柱，洗涤并用M‑去硫缓冲液处理。

4. 洗涤与洗脱：用M‑洗涤缓冲液洗涤柱子后，加入M‑洗脱缓冲液（≥10 µl）洗脱转换DNA。

五、注意事项

1. 去硫缓冲液作用时间不可超过建议的20分钟，以避免DNA降解。

2. 转换DNA为单链，低温下有有限的非特异性配对，长期保存需在‑70°C下进行，使用次数应尽量减少冻融循环。

3. 建议使用ZymoTaq DNA Polymerase或其他专为亚硫酸氢盐模板设计的高保真聚合酶进行扩增。

4. 转换DNA的定量方法需与处理前保持一致，并注意转换后模板碱基组成变化对检测方法的影响。

5. EZ DNA Methylation-Gold Kit为科研用途，不可用于临床诊断或治疗。操作请遵守实验室安全规程。

六、相关产品推荐

1. DNA/RNA Shield（货号:R1100‑50）：通用核酸稳定液，保护DNA/RNA免降解，适合样本储存与运输。

2. ZymoTaq DNA Polymerase（货号:E2001/E2002）：专为亚硫酸氢盐模板扩增设计的DNA聚合酶。

3. EZ DNA Methylation‑Lightning Kit：更快速的亚硫酸氢盐DNA转换方案。

4. Quick‑DNA/RNA Kits：快速提取高质量DNA / RNA，用于甲基化分析前的样本准备。