一、基本信息
产品货号:D5044/D5045
核心特点:高通量,磁珠纯化,直接转化
产品描述:EZ-96 DNA Methylation-Direct™ MagPrep是一种基于磁珠纯化技术的高通量DNA亚硫酸盐转化试剂盒。该产品无需预先提取DNA,可直接从血液、组织或细胞样本中完成亚硫酸氢盐转化、去硫酸化及DNA纯化步骤。其设计旨在最大限度地减少DNA降解与损失,并提供高效的胞嘧啶转化率,适用于大规模表观遗传学研究。
二、产品应用
EZ-96 DNA Methylation-Direct™ MagPrep适用于多种样本类型的高通量DNA甲基化分析研究。
△样本兼容性:适用于全血、Buffy coat、组织活检、培养细胞、FFPE样本及激光捕获显微切割(LCM)样本。
△高通量分析:专为96孔板格式优化,适合自动化工作站操作,实现大批量样本并行处理。
△下游应用:转化纯化后的DNA兼容多种下游分析技术,包括甲基化特异性PCR(MSP)、焦磷酸测序、微阵列分析及下一代测序(NGS)。
三、产品优势
✅直接转化:无需预先进行DNA提取,可直接从原始生物样本开始亚硫酸盐处理,简化工作流程并减少样本损失。
✅高灵敏度:对低起始量样本具有优异兼容性,最低可从10个细胞或50皮克(pg)DNA中成功获得转化产物。
✅高效纯化:整合磁珠纯化技术,在一个流程中同步完成亚硫酸盐转化、去硫酸化与DNA清洁回收,提高效率与一致性。
✅高转化率:可实现超过99.5%的非甲基化胞嘧啶向尿嘧啶的转化,同时对甲基化胞嘧啶的保护效率也超过99.5%。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 试剂配制:根据说明书要求,预先配制好蛋白酶K、CT转化试剂及M-洗涤缓冲液等工作液。
2. 样本裂解:对于细胞、组织或血液样本,加入含蛋白酶K的裂解缓冲液进行消化;若起始材料为纯化DNA,则直接进入转化步骤。
3. 亚硫酸盐转化:向裂解产物或DNA中加入CT转化试剂,在热循环仪或加热块上进行亚硫酸氢盐处理。
4. 结合与清洗:加入EZ-Methylation Magprep磁珠,结合转化后的DNA,随后使用洗涤缓冲液进行清洗。
5. DNA洗脱:使用低盐洗脱缓冲液或无菌水将纯化的、经亚硫酸盐处理的DNA从磁珠上洗脱下来。
五、注意事项
1. 样本起始量:推荐使用1×10^3至8×10^4个细胞或200-500 ng纯化DNA作为起始量,以获得最佳结果。
2. 设备要求:实验需配备适用于96孔板的磁力分离架和能够维持精确温度的加热元件(如热循环仪)。
3. 安全操作:部分试剂具有刺激性,操作时应佩戴手套和护目镜,并在符合安全规范的实验环境下进行。
4. 产品用途:本产品仅供科研使用,不适用于临床诊断或其他诊断用途。
5. 存储条件:试剂盒组分需按要求储存,配制后的部分工作液建议短期存放于-20°C。
六、相关产品推荐
1. EZ DNA Methylation-Direct™ Kit(货号:D5020/D5021):适用于中小通量样本的直接DNA亚硫酸盐转化。
2. EZ-96 DNA Methylation-Direct™ Kit (Shallow Well)(货号:D5022):浅孔96孔板格式的直接亚硫酸盐转化试剂盒。
3. EZ-96 DNA Methylation-Direct™ Kit (Deep Well)(货号:D5023):深孔96孔板格式的直接亚硫酸盐转化试剂盒,适用于更大反应体积。