一、基本信息
产品编号:R1002
核心特点:快速、温和、广谱、高纯度
产品描述:YeaStar™ RNA Kit是一款基于离心柱技术的总RNA提取试剂盒,专门用于从多种对酵母裂解酶敏感的、难以裂解的丝状真菌和酵母菌中快速纯化总RNA,包括小RNA/microRNA。该方法无需机械匀浆和有机变性剂,所得RNA纯度高,适用于多种下游应用。
二、产品应用
YeaStar™ RNA Kit适用于从多种真菌样本中提取高质量总RNA,具体应用包括:
△ 真菌转录组学研究:从多种丝状真菌和酵母中提取RNA,用于基因表达分析。
△ 实时定量PCR(RT-qPCR):获取高纯度RNA,确保逆转录和定量PCR结果的准确性与重复性。
△ 下一代测序(NGS):提取的RNA符合高通量测序对样本完整性和纯度的要求,适用于转录组测序等。
△ 小RNA分析:试剂盒可有效保留并纯化长度≥17个核苷酸的小RNA及microRNA。
△ 常规分子生物学实验:为Northern印迹、cDNA文库构建等下游应用提供高质量的RNA模板。
三、产品优势
✅ 操作简便:采用温和的酶学裂解结合离心柱纯化方案,避免了繁琐的机械破碎和有毒有机溶剂的使用。
✅ 样本兼容性广:适用于多种对酵母裂解酶敏感的真菌物种,包括曲霉、念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母和粟酒裂殖酵母等。
✅ 产出完整:可有效回收总RNA,涵盖从大分子RNA到小RNA/microRNA的完整片段范围。
✅ 高纯度:提取的RNA典型A260/A280及A260/A230比值均大于1.8,有效去除蛋白质、盐类及其他杂质。
✅ 即用型:纯化后的RNA无需进一步纯化步骤,可直接用于RT-qPCR、NGS等对RNA质量要求严格的下游应用。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 试剂准备:向浓缩的RNA洗脱缓冲液中加入指定体积的无水乙醇进行稀释;使用存储缓冲液复溶冻干的Zymolase酶,分装后于-20℃保存。
2. 样本收集:离心收集1-1.5 ml培养物中的1-5×10^7个真菌细胞,弃尽上清。
3. 酶解消化:向细胞沉淀中加入YR Digestion Buffer和Zymolase,充分重悬,于30-37℃孵育40-60分钟以消化细胞壁。
4. 裂解结合:加入YR Lysis Buffer充分涡旋混合,随后加入等体积乙醇并混匀。
5. 上柱吸附:将混合液转移至Zymo-Spin™ IIICG离心柱中,离心弃滤液。
6. 柱上洗涤:向离心柱中加入RNA Wash Buffer,离心弃滤液,此步骤重复两次以充分洗涤。
7. RNA洗脱:将离心柱转移至洁净的收集管中,向柱膜中央加入≥35 µl的DNase/RNase-Free Water,离心收集高纯度RNA。
五、注意事项
1. 储存条件:除复溶后的酶制剂需分装冻存外,试剂盒其他组分均可室温保存。
2. 安全防护:部分试剂具有刺激性,操作时应穿戴实验服、手套及护目镜,并在符合生物安全规范的场所进行。
3. 适用对象:本产品仅供研究使用,需由受过专业培训的人员操作。
4. 样本处理:消化时间可根据细胞沉淀体积进行调整,以确保裂解充分。
5. 质量控制:建议使用微量分光光度计或安捷伦生物分析仪对提取的RNA进行浓度和完整性检测。
六、相关产品推荐
1. Direct-zol RNA Miniprep & Lysis Tubes(货号:S6012-50)
2. Quick-RNA Fungal/Bacterial Kits(货号:R2014):适用于从各类真菌和细菌中快速提取总RNA的试剂盒系列。
3. RNA Clean & Concentrator-5(货号:R1013):用于对任何来源的RNA溶液进行纯化与浓缩,去除杂质并提高浓度。
4. Zymo-Seq RiboFree Total RNA Library Prep Kit(货号:R3000):用于在去除rRNA的同时进行下一代测序文库构建的专用试剂盒。