一、基本信息
产品编号:D4202(10次) / D4203(20次)
核心特点:超快速、高产量、超纯、无内毒素
产品描述:该试剂盒属于ZymoPURE系列,可处理≤150 ml的大肠杆菌培养物,单次制备可获得高达3 mg质粒DNA。采用改良碱裂解与专利结合体系,结合真空抽滤或离心柱纯化,省去酒精沉淀步骤,大幅缩短操作时间。适用于高拷贝或低拷贝质粒,并可处理大型质粒构建体(BAC/PAC)达200 kb。所得DNA无内毒素(≤0.025 EU/µg),可直接用于转染、病毒生产与体内研究。
二、产品应用
纯化得到的质粒DNA适用于:
△ 细胞转染 (Transfection)
△ 细菌转化 (Transformation)
△ 慢病毒/腺病毒/AAV生产
△ CRISPR与基因编辑 (Genome Editing)
△ 限制性内切酶消化 (Restriction Endonuclease Digestion)
△ 测序 (Sequencing)
△ 体外转录/翻译 (In Vitro Transcription/Translation)
△ PCR及其他敏感分子应用
三、产品优势
✅ 极致快速:16–18分钟内完成Maxiprep纯化。
✅ 超高产量:单次可获得高达3 mg质粒DNA;高拷贝质粒150 ml培养可得600–1200 µg。
✅ 浓度超高:质粒DNA浓度最高可达6 µg/µl。
✅ 无内毒素:≤0.025 EU/µg DNA,适合转染绝大多数细胞系及病毒生产。
✅ 彩色缓冲液:P1红色、P2蓝色、P3黄色,可视化裂解与中和过程,避免操作失误。
✅ 适用范围广:可处理<200 kb的大型质粒/BAC/PAC;兼容真空或离心操作。
✅ 无酒精沉淀步骤:直接柱洗脱,提高样品纯度与回收效率。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 加入P1(红色)缓冲液裂解菌体。
2. 加入P2(蓝色)进行碱裂解。
3. 加入P3(黄色)进行中和反应。
4. 将中和后的裂解液经过滤单元与结合缓冲液处理后加载至Zymo‑Spin柱,使用真空或离心结合DNA。
5. 依次使用Wash 1和Wash 2缓冲液洗涤去除杂质与内毒素。
6. 使用ZymoPURE Elution Buffer洗脱质粒DNA(≥300 µl)。
可选设备:微型离心机+真空抽滤系统或摆桶式离心机。
五、注意事项
1. 可处理高拷贝与低拷贝质粒;低拷贝建议参考说明书附录流程。
2. 大型质粒建议使用预温至50 ºC的洗脱缓冲液并延长柱上孵育时间至10分钟。
3. Gram阴性菌可直接使用标准流程;Gram阳性菌请参考说明书的专用流程。
4. 真空系统需提供≥400 mm Hg压力,并使用标准luer‑lock接口。
5. 本品限科研用途,不可用于诊断或治疗。
六、相关产品推荐
1. DNA/RNA Shield(货号:R1100‑50):通用核酸稳定液,用于保护样本中的DNA和RNA。
2. DNA/RNA Shield SafeCollect Swab Collection Kit(货号:R1160):含拭子及稳定液的采样套装。
3. ZymoPURE II Plasmid Midiprep Kit:适用于中量培养物中提取转染级质粒DNA。
4. ZR BAC DNA Miniprep Kit:适合大型BAC、PAC质粒的提取。