一、基本信息  

产品编号：D4208T（10次处理）/ D4209 （50次处理）/ D4210（100次处理）/ D4211（400次处理） / D4212（800次处理）  

核心特点：超快、超低内毒素、高浓度  

产品描述：Zymo Research ZymoPURE Plasmid Miniprep Kit采用改良碱裂解-硅胶膜技术，可在 15 min 内从 ≤5 ml 大肠杆菌过夜培养物中纯化高达 100 µg 的转染级质粒 DNA，内毒素 ≤1 EU/µg，适用于 200 kb 以内任意 construct，终体积可低至 25 µl，浓度可达 3 µg/µl。

二、产品应用  

Zymo Research ZymoPURE Plasmid Miniprep Kit提供内毒素极低的高纯度质粒 DNA，满足生命科学研究与生物工艺开发的多元需求：  

△ 转染：原代、干细胞及敏感细胞系的高效 DNA 递送  

△ 病毒包装：慢病毒、腺病毒、AAV 载体的大规模生产  

△ 基因编辑：CRISPR-Cas9/12 系统瞬时转染或体外组装  

△ 测序：Sanger、NGS 及长读长平台的高保真模板制备  

△ 体外表达：无细胞蛋白合成与 mRNA 体外转录  

△ 分子克隆：快速限制酶切、PCR、连接与转化

三、产品优势  

✅ 极速：完整操作流程 ≤15 min，显著缩短实验周期。  

✅ 高纯：A260/280 ≥1.8、A260/230 ≥2.0，内毒素水平 ≤1 EU/µg，可直接用于转染。  

✅ 高得率：高拷贝质粒 4–8 µg/ml 培养物，低拷贝亦可稳定回收。  

✅ 大容量：可处理 ≤200 kb 超大片段，满足复杂载体需求。  

✅ 低洗脱：25 µl 起灵活定容，DNA 浓度高达 3 µg/µl，减少后续浓缩步骤。 

✅ 可视化：颜色缓冲体系实时指示裂解与中和完全度，降低操作误差。

四、使用说明（实验流程概要）  

1. 收菌：离心 0.5–5 ml 过夜菌液，弃上清。  

2. 重悬：以 250 µl P1（红）彻底分散细胞沉淀。  

3. 裂解：加 250 µl P2（蓝）轻柔颠倒 8–10 次，静置 3 min。  

4. 中和：加 250 µl P3（黄）颠倒至黄色并出现絮状沉淀。  

5. 澄清：≥16 000 × g 离心 5 min，取 600 µl 上清。  

6. 结合：加入 260 µl Binding Buffer，涡旋 15 s。  

7. 过柱：真空或离心方式上样至 Zymo-Spin™ II-PX 柱。  

8. 洗涤：依次用 Wash 1 与 Wash 2 去除蛋白、盐及内毒素。  

9. 干柱：空离 1 min 彻底去除残留乙醇。  

10. 洗脱：加 25 µl Elution Buffer 静置 2 min，离心回收 DNA。

五、注意事项  

1. 乙醇：Wash 2 浓缩液使用前务必按说明书补加 95–100% 乙醇。  

2. 温度：全程室温（15–30 °C）操作，低温易致 P2 沉淀影响裂解。  

3. 菌量：OD600 0.35 以内收菌，过量易导致基因组污染与柱堵塞。  

4. 颠倒：裂解与中和步骤禁止剧烈涡旋，防止染色体 DNA 断裂污染。  

5. 储存：纯化后 DNA 分装保存于 –20 °C 或更低，避免反复冻融。

六、相关产品推荐  

1. ZymoPURE II Plasmid Midiprep Kit（货号：D4200/D4201）：从50 ml大肠杆菌培养液中纯化高达 1.2 mg 无内毒素质粒 DNA 的最快速、最简便的方法。

2. ZymoPURE II Plasmid Maxiprep Kit（货号：D4202/D4203）：从 150 ml 大肠杆菌培养液中纯化高达 3 mg 无内毒素质粒 DNA 的最快速、最简便的方法。

3. Quick-DNA Microprep Plus Kit（货号：D4074）：支持更大或更小样本量的灵活提取方案