一、基本信息
产品编号:D4300(50次)、D4300T(5次)、D4304(50次,无微珠)
核心特点:无偏差裂解、抑制剂去除、低生物负载、全流程≤45 min
产品描述:Zymo Research ZymoBIOMICS DNA Miniprep Kit采用超高密度BashingBead™与OneStep™抑制剂清除技术,可在45 min内从粪便、土壤、水体、拭子、生物膜等样本中同步裂解革兰氏阳性/阴性菌、真菌、孢子、原生动物及藻类,获得15–20 kb、产量高达25 µg的超纯DNA,适用于16S/ITS测序、宏基因组、qPCR与芯片分析。
二、产品应用
Zymo Research ZymoBIOMICS DNA Miniprep Kit为微生物组与宏基因组研究提供标准化DNA提取方案:
△粪便微生物组:200 mg以内人源或动物粪便
△土壤微生态:250 mg以内各类土壤与沉积物
△水体生物膜:250 µl以内地表水、废水或滤膜
△拭子样本:口腔、皮肤、阴道、环境表面
△细胞与生物膜:50–100 mg湿重培养物或生物膜
△组织与昆虫:经液氮或Proteinase K预处理后的硬组织
三、产品优势
✅ 无偏差裂解:经ZymoBIOMICS™ Microbial Community Standard验证,八种细菌与两种真菌回收率与理论值偏差<5%。
✅ 抑制剂清除:OneStep™ III-HRC滤柱同步去除腐殖酸、富里酸、黑色素、多酚,35%洗脱液直接PCR无抑制。
✅ 低生物负载:试剂盒批检<3 细菌基因组拷贝 µl⁻¹,确保低丰度微生物可信检测。
✅ 高完整性:平均片段15–20 kb,满足Oxford Nanopore、PacBio长读长测序需求。
✅ 操作极简:裂解-结合-洗脱三步完成,无需醇沉或过夜孵育,总手动操作≈25 min。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 取样:将≤200 mg样本加入ZR BashingBead™裂解管,加入750 µl Lysis Solution。
2. 裂解:按设备推荐参数机械匀浆,确保Gram+菌与孢子充分破碎。
3. 离心:≥10 000 × g 1 min,转移上清。
4. 过滤:上清经Zymo-Spin™ III-F滤柱去除颗粒。
5. 结合:加DNA Binding Buffer,过Zymo-Spin™ IICR柱,依次用Wash Buffer 1/2洗涤。
6. 洗脱:≥50 µl 60 °C DNase/RNase-Free Water洗脱DNA。
7. 精纯:洗脱液过Zymo-Spin™ III-HRC柱,终产物可直接用于下游。
五、注意事项
1. 校准:首次使用须以ZymoBIOMICS™ Microbial Community Standard校准裂解强度,避免裂解不足或过裂解。
2. 防污染:实验台面以10%次氯酸钠擦拭,滤柱及缓冲液开启后即时封口,必要时在生物安全柜内操作。
3. 样本量:高腐殖质土壤或黏稠粪便若出现堵柱,应减少起始量或稀释裂解液。
4. 保存:DNA洗脱后-20 °C避光保存,长期保存建议-80 °C;避免反复冻融>3次。
5. 设备:TissueLyser I/II、Retsch MM 400未经验证,不建议替代。
六、相关产品推荐
1. ZymoBIOMICS™ Microbial Community Standard(货号:D6300细胞型/D6305 gDNA型)
2. Quick-DNA™ 96 Plus Kit(货号:D4070/D4071):96 孔板高通量版本
3. DNA/RNA Shield (货号: R1100-50):用于保护任何生物样本中的DNA和RNA,便于样本储存和运输。
4. ZR BashingBead™ Lysis Tubes(货号:S6003/S6012/S6014):坚硬样本(细菌、酵母、植物、土壤)机械匀浆专用