一、基本信息
产品编号:R2002
核心特点:广谱裂解、双核酸共提、高纯度、高灵敏度
产品描述:Zymo Research ZymoBIOMICS™ DNA/RNA Miniprep Kit是一款用于从复杂样本中同步提取高质量微生物组总DNA和总RNA的试剂盒。其采用创新的物理与化学联合裂解系统,可无偏好性地裂解包括革兰氏阳性/阴性细菌、真菌、原生动物及病毒在内的多种微生物。通过优化的柱纯化流程,能有效去除抑制剂,获得适用于下一代测序、RT-qPCR等高通量和高灵敏度下游应用的核酸。
二、产品应用
Zymo Research ZymoBIOMICS™ DNA/RNA Miniprep Kit适用于从多种环境及生物样本中提取微生物组DNA和RNA,用于微生物群落分析。
△微生物组研究:从粪便、土壤、水体、生物膜等环境样本中提取微生物核酸,用于群落结构与功能分析。
△宿主-微生物互作研究:从唾液、拭子、体液等临床相关样本中同步获取宿主与微生物的核酸信息。
△植物微生物组分析:从植物组织或根系相关样本中提取微生物DNA和RNA,研究植物相关微生物群落。
△病毒组学分析:有效裂解病毒颗粒,提取病毒核酸,适用于病毒群落研究。
三、产品优势
✅广谱裂解:采用ZR BashingBead™裂解管与专用裂解液,可高效破碎包括具有坚韧细胞壁的革兰氏阳性菌和真菌在内的各类微生物,确保群落代表性。
✅高纯度核酸:纯化过程有效去除腐殖酸、多酚、多糖等常见抑制剂,所得DNA和RNA的A260/A280及A260/A230比值均大于1.8,兼容敏感的下游应用。
✅双核酸共提:可从一个样本中同时分离出总DNA和总RNA(包括小RNA),最大化利用珍贵样本,并便于进行关联性分析。
✅操作便捷:流程整合了样本保存、裂解、纯化及柱上DNase消化步骤,减少了样本转移损失,提高了实验效率与一致性。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本预处理:将样本与DNA/RNA Shield™溶液混合,以稳定核酸并灭活核酸酶,可在室温下储存或运输。
2. 高效裂解:将预处理后的样本转移至含有BashingBead™的裂解管中,加入裂解缓冲液,通过涡旋振荡进行机械破碎与化学裂解。
3. 杂质去除:将裂解液转移至Zymo-Spin™ III-HRC过滤器中离心,以去除颗粒杂质和部分抑制剂。
4. 核酸结合:在上清液中加入制备缓冲液,混合后转移至Zymo-Spin™ IIICG吸附柱中离心,使核酸结合至硅胶膜。
5. 柱上消化:在吸附柱膜上直接进行DNase I消化反应,以去除基因组DNA污染,纯化得到RNA;若需DNA,可省略此步或使用平行流程。
6. 洗涤纯化:使用添加乙醇的洗涤缓冲液对结合在膜上的核酸进行洗涤,彻底去除盐分及有机杂质。
7. 洗脱回收:使用无核酸酶水洗脱柱膜,获得高纯度的总RNA(或总DNA),收集洗脱液用于后续实验。
五、注意事项
1. 储存条件:试剂盒各组分(缓冲液、吸附柱等)建议室温干燥保存;使用前请按说明书向浓缩洗涤缓冲液中加入指定体积的无水乙醇。
2. 样本量:严格按照推荐样本量操作,过量样本可能导致裂解不彻底或柱膜堵塞,影响提取效率与纯度。
3. 抑制剂残留:对于腐殖质含量极高的土壤或色素深的样本,建议增加一次HRC制备溶液处理步骤,以充分去除抑制剂。
4. 核酸酶污染:实验过程中需使用无核酸酶耗材,并避免试剂被RNase或DNase污染,尤其在RNA提取流程中。
5. 安全规范:部分试剂为刺激性化学品,操作时应佩戴手套、实验服及护目镜,并在通风橱或生物安全柜内进行,遵循实验室安全规程。
六、相关产品推荐
1. ZymoBIOMICS™ DNA Miniprep Kit(货号:D4300):专门用于从复杂样本中提取微生物组基因组DNA,流程更简洁。
2. ZymoBIOMICS™ MagBead DNA/RNA Kit(货号:R2135):采用磁珠法进行微生物组DNA和RNA的提取,便于实现自动化高通量操作。
3. Quick-DNA/RNA™ MagBead Kit(货号:R2130):一款快速的磁珠法提取试剂盒,适用于从多种样本类型中纯化DNA和RNA。