一、基本信息
产品编号:R1072
核心特点:高回收率、高纯度、操作便捷、兼容广泛
产品描述:Zymo Research Quick-cfDNA/cfRNA™ Serum & Plasma Kit设计用于从血浆、血清及其他生物体液样本中,高效共纯化或分别纯化循环游离DNA和RNA,包括蛋白结合、外泌体及小RNA等所有形式。采用创新结合系统,无需酚氯仿等有毒试剂,所得核酸纯度高,适用于RT-qPCR、二代测序等下游应用。
二、产品应用
Zymo Research Quick-cfDNA/cfRNA™ Serum & Plasma Kit适用于从多种生物体液中分离高纯度的循环游离核酸。
△液体活检研究:从血浆、血清等样本中获取用于癌症早筛、无创产前诊断等研究的cfDNA与cfRNA。
△外泌体与小RNA分析:高效回收包括microRNA在内的各类小RNA,适用于外泌体研究及小RNA测序文库构建。
△感染性疾病检测:从脑脊液、尿液等体液中纯化病原体游离核酸,用于病原体检测与载量分析。
△生物标志物开发:为基于循环核酸的生物标志物发现与验证提供高质量起始材料。
三、产品优势
✅高灵敏度:创新的结合系统可实现对microRNA的高效捕获,回收率相比同类产品提升高达515倍。
✅高纯度:纯化过程避免使用酚氯仿,所得核酸杂质残留少,可直接用于RT-qPCR、数字PCR及下一代测序等敏感应用。
✅操作便捷:流程简化,无需繁琐的蛋白沉淀步骤,可在约30-45分钟内完成10个样本的手工操作。
✅灵活兼容:支持从高达3ml的多种生物体液(如血浆、血清、脑脊液、羊水、尿液)中纯化核酸,并与Streck采血管兼容。
✅线性可扩展:核酸回收量与上样体积(最高3ml)呈线性关系,便于根据下游应用需求调整样本量。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本预处理:将血浆或血清样本以≥12,000 ×g离心15分钟,以去除细胞碎片和沉淀。
2. 消化裂解:向澄清样本中加入等体积Digestion Buffer和适量Proteinase K,涡旋混匀后于37°C孵育2小时。
3. 结合体系制备:向消化后样本中加入1体积Binding Buffer和1.5体积异丙醇,充分涡旋混匀。
4. 核酸捕获:将上述混合物加载至装配好的Spin-Away™ Filter中进行真空抽滤。
5. 洗涤:向过滤器中加入RNA Prep Buffer进行真空洗涤。
6. DNA洗脱:将过滤器转移至收集管,离心去除残留液后,加入Cell-free Recovery Buffer,孵育并离心,收集含cfDNA的穿透液。
7. RNA结合与洗涤:将上一步穿透液转移至Zymo-Spin™ IC柱中,离心后将柱子置于新管,用RNA Wash Buffer洗涤。
8. RNA洗脱:向柱子膜中央加入6-15 µl无酶水,离心洗脱得到高浓度cfRNA。
五、注意事项
1. 试剂储存:Proteinase K溶解后需于-20°C保存;RNA Wash Buffer浓缩液使用前需按比例加入无水乙醇。
2. 样本处理:为保持囊泡和蛋白复合物的完整性,建议尽量减少样本冻融循环,并在消化前避免剧烈震荡。
3. 特殊样本:对于来源于Streck Cell-Free DNA/RNA BCT®采血管的样本,需先在55°C的Digestion Buffer中预孵育,再进行蛋白酶K消化。
4. 无DNA污染要求:若下游应用要求RNA中完全无DNA残留,建议使用DNase I Set对cfRNA洗脱液进行处理。
5. 洗脱体积:为获得最大总产量,建议使用15 µl无酶水洗脱;为获得高浓度洗脱液,可使用最少6 µl。
六、相关产品推荐
1. Quick-cfRNA™ Serum & Plasma Kit(货号:R1059):专门用于从血清、血浆中纯化循环游离RNA。
2. Quick-cfDNA™ Serum & Plasma Kit(货号:D4076):专门用于从血清、血浆中纯化循环游离DNA。
3. DNase I Set(货号:E1010):用于从RNA样本中彻底去除基因组DNA污染。
4. Oligo Clean & Concentrator™(货号:D4060/D4061):用于纯化与浓缩寡核苷酸及小片段核酸。
5. DNA/RNA Shield™(货号:R1100-50):用于在室温下稳定保存生物样本中的核酸。