一、基本信息

产品编号：E2054/E2055

核心特点：即用型预混液、热启动、优化用于亚硫酸盐转化DNA、含SYTO 9®染料

产品描述：ZymoTaq™ qPCR PreMix是一种即用型2X预混液，专为实时定量PCR（qPCR）设计，尤其优化用于对亚硫酸盐转化处理的DNA进行稳健扩增，适用于DNA甲基化分析。该预混液包含热启动ZymoTaq™ DNA聚合酶、优化的缓冲液、dNTPs以及高灵敏度的双链DNA（dsDNA）结合染料SYTO 9®，无需额外添加染料或镁离子，简化了实验流程。该产品也适用于高分辨率熔解曲线分析、SNP分型及常规基因表达定量等应用。

二、产品应用

ZymoTaq™ qPCR PreMix适用于多种基于实时荧光PCR的分子检测与分析。

△DNA甲基化分析：对经亚硫酸盐处理的DNA进行特异性定量PCR，用于甲基化水平检测。

△基因表达定量：对cDNA模板进行灵敏、准确的绝对或相对定量分析。

△高分辨率熔解曲线分析：用于SNP分型、突变扫描及甲基化状态区分。

△病原体检测与定量：对细菌、真菌或病毒的低拷贝DNA进行灵敏检测。

三、产品优势

✅即用便捷：预混了除模板和引物外的所有必需组分，简化加样步骤，减少操作误差。

✅甲基化检测优化：采用特殊缓冲体系与热启动酶，可高效扩增经亚硫酸盐处理而序列复杂性降低的DNA模板。

✅高灵敏度：内置SYTO 9®荧光染料，信号强度高，可实现低拷贝数模板的精准检测。

✅广泛兼容性：适用于多数实时荧光PCR仪，无需被动参考染料，并兼容HRM等多种下游分析。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 反应体系配制：在冰上按推荐比例混合预混液、引物、模板DNA及无核酸酶水。

2. 上机运行：将反应管置于实时PCR仪中，设置相应的荧光检测通道（如FAM/SYBR Green通道）。

3. 程序设置：运行包括初始热激活、变性、退火、延伸及熔解曲线分析的标准qPCR循环程序。

4. 数据分析：使用仪器配套软件分析扩增曲线和Ct值，或进行熔解曲线分析以获取结果。

五、注意事项

1. 储存条件：本品应于-20°C避光保存，避免反复冻融以保证试剂活性。

2. 模板质量：建议使用高质量、无污染的DNA模板，对于亚硫酸盐转化DNA，应确保转化完全并纯化充分。

3. 引物设计：用于甲基化分析的引物应针对亚硫酸盐转化后的序列进行特异性设计。

4. 光学校准：使用前请根据仪器说明书确认荧光检测通道与SYTO 9®染料的激发/发射光谱匹配。

5. 生物安全：本品仅供研究使用，操作时应佩戴适当的个人防护装备。

六、相关产品推荐

1. EZ DNA Methylation-Lightning™ Kit（货号：D5030/D5031）：用于快速、高效的DNA亚硫酸盐转化与纯化。

2. Femto™ Human Quantification Kit（货号：E2005）：用于极低拷贝数人类DNA的绝对定量检测。

3. Zymo Taq™ DNA聚合酶（货号：E2001/E2002）：单独的热启动DNA聚合酶，用于用户自行配置PCR反应体系。

5. Human Methylated and Non-methylated DNA Set（货号：D5014）：包含甲基化与非甲基化的人类DNA对照，用于实验体系验证与标准化。