一、基本信息

产品名称：Q5®高保真DNA聚合酶

产品货号：M0491S / M0491L

规格：100 units / 500 units

保存温度：-20°C

二、产品介绍

Q5®高保真DNA聚合酶是一款具有3´→5´核酸外切酶活性的热稳定性DNA聚合酶，其通过融合Sso7d结构域增强了持续合成能力。该酶保真度极高，其错误率较Taq DNA聚合酶低约280倍，适用于克隆、长片段扩增及高GC含量等复杂模板的PCR反应，并配有优化的缓冲体系以保证扩增的稳健性。

三、产品应用

Q5®高保真DNA聚合酶适用于多种高保真DNA扩增应用。

△高保真PCR：用于需要极高序列准确性的扩增实验。

△克隆实验：适用于基因克隆等下游应用，可最大程度减少引入突变。

△长片段或困难模板扩增：能够高效扩增长片段或高GC/高AT含量的复杂模板。

△高通量PCR：适用于需要快速、稳定扩增的高通量实验流程。

四、产品优势

✅高保真性：错误率较Taq DNA聚合酶低约280倍，提供超低错误率。

✅宽泛的模板适应性：优化的缓冲系统使其对高AT到高GC含量的各种模板均能实现稳健扩增。

✅高持续合成能力：融合的Sso7d结构域增强了酶的持续合成能力，提升了扩增速度和成功率。

✅操作便捷：兼容通用的62°C退火温度程序，简化了PCR条件优化步骤。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配制：在冰上配制反应体系，包括Q5高保真DNA聚合酶、5X Q5反应缓冲液、dNTPs、引物、模板DNA及无核酸酶水。

2. 循环设置：建议采用三步法PCR程序，包括初始变性、后续循环（变性、退火、延伸）及最终延伸。对于常规应用，推荐使用62°C进行退火。

3. 条件优化：对于GC含量≥65%的模板，建议在反应体系中添加5X Q5高GC增强剂以改善扩增效果。推荐使用NEB Tm计算器确定特定引物对的最佳退火温度。

六、注意事项

1. 保存条件：本品应保存于-20°C，使用前请短暂离心并在冰上操作。

2. 缓冲液选择：常规应用使用5X Q5反应缓冲液；对于高GC含量模板，需额外添加5X Q5高GC增强剂。

3. 引物设计：为确保最佳性能，建议使用NEB Tm计算工具进行引物设计和退火温度计算。

4. 配套试剂：反应需要但未随产品提供的必需试剂包括脱氧核苷酸（dNTP）溶液混合物和无核酸酶水。

七、相关产品推荐

1. Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase（货号：M0493）

2. Q5® High-Fidelity 2X Master Mix（货号：M0492）

3. Q5® Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix（货号：M0494）

4. Deoxynucleotide (dNTP) Solution Mix（货号：N0447）

5. Deoxynucleotide (dNTP) Solution Set（货号：N0446S）

6. Q5® Reaction Buffer Pack（货号：B9027S）