一、基本信息
产品名称:AvrII 限制性内切酶
产品货号:R0174S / R0174L
规格:100 units / 500 units,酶浓度为5,000 units/ml。
保存温度:-20°C保存。
二、产品介绍
AvrII是一种从鱼腥藻(Anabaena variabilis UW)中克隆的限制性内切酶,由携带该基因的重组大肠杆菌表达生产。该产品经过重新配方,添加了重组白蛋白(rAlbumin),旨在提高酶的稳定性。它能够识别并切割5‘-CCTAGG-3’序列,产生5‘端CTAG粘性末端。
三、产品应用
AvrII限制性内切酶适用于多种分子克隆实验:
△快速克隆:适用于需要快速酶切反应的克隆流程。
△限制性酶切:用于DNA样品的特异性切割与图谱分析。
四、产品优势
✅快速高效:经Time-Saver™认证,可在5-15分钟内完成消化反应。
✅缓冲液兼容性:在rCutSmart™缓冲液中具有100%活性,该通用缓冲液支持超过210种酶,极大简化了双酶切实验设计。
✅配套齐全:产品附带一管紫色6X凝胶上样染料,方便后续电泳分析。
✅末端兼容性:切割产生5‘-CTAG突出末端,可与NheI、SpeI或XbaI酶切产生的片段进行高效连接。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 体系配制:在冰上配制反应体系,确保包含1X rCutSmart™缓冲液、适量DNA底物及AvrII酶。
2. 温育消化:将反应体系置于37°C恒温设备中进行孵育。
3. 反应终止:该酶无法通过热失活灭活,反应结束后需通过柱纯化、凝胶回收或酚/氯仿抽提等方法纯化DNA产物。
4. 电泳分析:可加入提供的6X紫色上样染料,进行琼脂糖凝胶电泳以验证酶切效果。
六、注意事项
1. 储存条件:酶及配套缓冲液需长期保存于-20°C,上样染料可于25°C保存。
2. 失活方法:请注意AvrII无法通过加热失活,需采用物理分离方法(如柱纯化或凝胶回收)以去除或灭活酶。
3. 甲基化影响:其酶切活性不受dam、dcm或CpG甲基化的影响。
4. 同裂酶:AspA2I和XmaJI为AvrII的同裂酶,识别相同序列。
七、相关产品推荐
1. rCutSmart™缓冲液(货号:B6004S)
2. 紫色凝胶上样染料,6X(货号:B7024S)