一、基本信息
产品名称:MluI-HF®限制性内切酶
产品货号:R3198S / R3198L
规格:1,000units/ 5,000 units
保存温度:-20°C
二、产品介绍
MluI-HF®是一种高保真限制性内切酶,识别并切割双链DNA中的ACGCGT序列,产生粘性末端。该酶来源于藤黄微球菌,经工程化改造后,在rCutSmart™缓冲液中具有100%活性,并显著降低了星号活性。产品包含优化的反应缓冲液和凝胶上样染料。
三、产品应用
本产品主要用于DNA的限制性酶切实验。
△DNA克隆:用于构建重组质粒时对DNA插入片段或载体的特异性切割。
△质粒图谱分析:用于验证质粒构建或分析DNA结构。
△基因分型:用于通过限制性片段长度多态性进行基因型鉴定。
四、产品优势
✅高保真:经过工程化改造,在标准反应条件下星号活性显著降低,确保切割特异性。
✅高效兼容:在单一rCutSmart™缓冲液中即可实现100%酶切活性,简化实验流程。
✅快速便捷:符合Time-Saver™标准,可在5-15分钟内完成消化反应,节省实验时间。
✅即用配套:产品随附紫色(6X)凝胶上样染料,便于后续的琼脂糖凝胶电泳分析。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 体系配制:在冰上于微量离心管中依次加入无菌水、1X rCutSmart™缓冲液、底物DNA及适量MluI-HF®酶。
2. 温育反应:将反应体系置于37°C恒温设备(如水浴锅或孵育器)中孵育15-60分钟。
3. 终止与分析:反应结束后,可直接加入随附的凝胶上样染料,或通过加热方式使酶失活,随后进行琼脂糖凝胶电泳以分析酶切结果。
六、注意事项
1. 储存条件:酶制剂应始终保存于-20°C,使用前置于冰上,使用后立即放回,避免反复冻融。
2. 反应条件:推荐使用随附的rCutSmart™缓冲液以获得最佳酶活,孵育温度为37°C。
3. 甲基化影响:该酶的切割活性会被CpG位点的甲基化所抑制,实验设计时需考虑DNA甲基化状态。
4. 失活特性:该酶无法通过加热方式失活,如需终止反应,请使用其他方法。
七、相关产品推荐
1. rCutSmart™缓冲液(货号:B6004S)
2. 凝胶上样染料,紫色(6X)(货号:B7024A)