一、基本信息
产品名称:TransIT-X2® Dynamic Delivery System
产品货号:MIR 6000 / MIR 6003 / MIR 6004 / MIR 6005 / MIR 6006
规格:0.3 ml / 0.75 ml / 1.5 ml / 5 × 1.5 ml / 10 × 1.5 ml
产品组分:非脂质体聚合物转染试剂
递送分子类型:质粒DNA,siRNA,DNA与siRNA共转染
细胞类型:多种贴壁细胞系及原代细胞
二、产品概述
TransIT-X2® Dynamic Delivery System是一种基于非脂质体聚合物的先进转染试剂,专为高效递送核酸分子至多种细胞而设计。该系统能有效转染包括原代细胞在内的多种细胞类型,支持DNA、siRNA的单独或共转染。其操作流程简便,转染过程无需更换培养基,并可在含血清的培养基中进行,显著提升了实验的便捷性与兼容性。
三、产品应用
△质粒DNA转染:用于将报告基因、过表达或干扰质粒高效导入哺乳动物细胞,以进行基因功能研究或蛋白生产。
△siRNA转染:通过递送小干扰RNA实现靶向基因的敲低,适用于基因功能缺失研究及信号通路分析。
△DNA/siRNA共转染:支持在同一细胞体系中同时递送DNA和siRNA,适用于复杂的基因调控与功能验证实验。
四、产品优势与特点
✅高效广谱:采用先进的聚合物配方,对包括难转染的原代细胞在内的多种细胞类型均能实现高效率转染。
✅操作简便:转染复合物可直接加入含血清的完全培养基中,无需在转染前后更换培养基,简化了实验步骤。
✅灵活兼容:支持DNA、siRNA单独递送或共转染,为多样化的实验设计提供单一解决方案。
✅条件优化:提供明确的起始比例与优化范围,并针对不同培养容器给出详细推荐条件,便于用户快速建立最优转染方案。
五、使用说明(概述)
以下以6孔板中质粒DNA转染为例,概述瞬时转染方案的关键步骤:
1. 细胞铺板:于转染前18-24小时,将细胞接种于6孔板中,使用完全生长培养基,确保转染时细胞融合度达到80%或更高。
2. 试剂准备:使用前将TransIT-X2®试剂平衡至室温并轻轻涡旋混匀。
3. 稀释核酸:在无菌离心管中加入250 µl Opti-MEM I减血清培养基,随后加入2.5 µl质粒DNA储备液(1 µg/µl),轻柔混匀。
4. 形成复合物:向上述混合液中加入7.5 µl TransIT-X2®试剂,轻柔混匀后,于室温静置孵育15-30分钟,以形成转染复合物。
5. 添加复合物:将形成的转染复合物逐滴均匀加入细胞培养孔的不同区域。
6. 孵育培养:轻轻摇晃培养板使复合物分布均匀,随后将细胞放回培养箱中,在37°C、5% CO2条件下继续培养24-72小时。
7. 结果分析:孵育结束后,收集细胞并进行下游的基因表达或蛋白功能检测。
六、注意事项
1. 存储条件:本品需保存于-20°C,避免反复冻融。使用前需平衡至室温并涡旋混匀。
2. 核酸质量:推荐使用高纯度、无菌、无内毒素污染的DNA进行转染。使用含有高水平内毒素的DNA制备物可能显著降低转染效率并影响细胞健康。
3. 抗生素使用:在配制转染复合物的步骤中应使用不含抗生素的培养基。复合物形成后,可将其加入含有低浓度青霉素/链霉素(终浓度0.1-1X)的完全培养基中。
4. 条件优化:转染效率受细胞类型、融合度、核酸用量与试剂比例等多种因素影响。建议根据产品推荐范围进行条件优化,以获得最佳实验结果。
5. 实验安全:本品仅供研究使用,不适用于诊断或治疗用途。操作时应遵循实验室生物安全规范。
七、相关产品推荐
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