一、基本信息
产品编号:52904/52906
核心特点:快速、高效、高灵敏度、自动化兼容
产品描述:QIAamp Viral RNA Mini Kit是一款基于硅胶膜技术的病毒RNA纯化试剂盒,专为从血浆、血清等无细胞体液样本中高效提取病毒RNA而设计,适用于下游分子生物学应用,如逆转录聚合酶链式反应。
二、产品应用
QIAamp Viral RNA Mini Kit主要用于从临床或研究样本中纯化病毒RNA,适用于多种下游分子检测。
△病毒检测与分型:为基于RT-PCR、qRT-PCR等核酸扩增技术的病毒检测、定量和基因分型提供高质量RNA模板。
△分子流行病学研究:从血清、血浆等样本中提取病毒RNA,用于病毒基因组测序、进化分析和传播链追踪。
△疫苗与抗病毒药物研发:纯化病毒RNA以评估病毒载量变化、研究病毒复制动力学或进行体外转录等实验。
三、产品优势
✅高纯度:采用高效裂解液Buffer AVL,能迅速灭活RNase,最大程度保证病毒RNA的完整性,避免降解。
✅高灵敏度:试剂盒包含载体RNA,可显著提高低病毒载量样本中目标核酸的吸附效率,确保高回收率。
✅操作灵活:兼容手动离心、真空抽滤及QIAcube全自动工作站三种操作模式,满足不同通量和自动化需求。
✅快速高效:基于硅胶膜离心柱的纯化流程步骤精简,可在短时间内同时处理多个样本,缩短实验周期。
✅安全可靠:实验流程设计有效防止样本间交叉污染,并允许对潜在传染性样本进行安全的闭管操作。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本裂解:将140-280 µL样本与含有载体RNA的Buffer AVL裂解液充分混合,室温孵育以灭活RNase并释放病毒RNA。
2. 结合与洗涤:将裂解混合物转移至QIAamp Mini离心柱,通过离心或真空使RNA特异性结合至硅胶膜,随后使用Buffer AW1和Buffer AW2进行两次洗涤以去除杂质。
3. 洗脱:将离心柱置于新的收集管上,加入Buffer AVE或无RNase水,室温静置后离心,即可将纯化的病毒RNA洗脱下来。
五、注意事项
1. RNase污染防控:RNA极易被RNase降解,实验全程需佩戴手套,使用无RNase耗材,并保持工作区清洁。
2. 样本处理:建议使用新鲜或单次冻融的无细胞体液样本(如EDTA抗凝血制备的血浆),反复冻融会降低病毒滴度,影响提取效率。
3. 载体RNA配制:冻干载体RNA需用Buffer AVE溶解至1 µg/µL,分装后于-30至-15°C保存,避免反复冻融超过3次。
4. DNA共纯化:本试剂盒不区分病毒RNA与细胞DNA,若样本中含有细胞,DNA将被同步纯化。为获得纯净病毒RNA,建议使用确认为无细胞的体液样本。
5. 产量测定:病毒RNA产量通常低于1 µg,不建议使用分光光度法测定。推荐采用定量RT-PCR方法进行准确定量。
六、相关产品推荐
1. RNeasy Mini Kit(货号:74104):用于从动物细胞、组织及酵母中快速纯化总RNA。
2. QIAamp DNA Mini Kit(货号:51304):用于从多种样本类型(如血液、细胞、组织)中纯化基因组DNA。
3. QIAamp MinElute Virus Spin Kit(货号:57704):专门为从大体积(最高可达5 mL)液体样本中浓缩和纯化病毒核酸而优化设计。