一、基本信息
产品编号:28506
核心特点:室温稳定、高效纯化、操作便捷
产品描述:本产品为QIAquick凝胶回收与PCR产物纯化试剂盒系列,采用硅胶膜离心柱技术,可从琼脂糖凝胶中高效回收70 bp至10 kb的DNA片段,或纯化PCR反应产物。试剂盒组分可在15–25°C室温条件下稳定保存长达12个月。
二、产品应用
QIAquick试剂盒专为核酸纯化设计,适用于多种分子生物学下游应用。
△DNA片段回收:从琼脂糖凝胶中特异性回收目标DNA条带。
△PCR产物纯化:去除PCR反应体系中的引物、dNTPs、酶及盐离子等杂质。
△酶促反应前处理:为测序、体外转录、平末端连接等实验提供高纯度DNA模板。
△显微注射样品制备:纯化用于显微注射的高质量DNA。
三、产品优势
✅高效结合:硅胶膜在优化缓冲液条件下可高效吸附DNA,确保高回收率。
✅严格去杂:独特的缓冲液系统能有效去除琼脂糖、蛋白质、盐类及其他酶促反应抑制剂。
✅快速流程:无需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀,大部分流程可在15-20分钟内完成。
✅应用广泛:纯化的DNA适用于克隆、测序、标记、酶切、连接等多种下游实验。
✅室温存储:所有缓冲液及离心柱可于室温保存,方便储存与取用。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 切胶:使用洁净刀片从琼脂糖凝胶中切取含目标DNA的凝胶块。
2. 溶胶:将凝胶块称重后置于离心管中,加入Buffer QG,于50°C孵育直至凝胶完全溶解。
3. 调节结合:溶胶后若溶液不为黄色,需加入醋酸钠调节pH,以确保DNA结合效率。
4. 加入异丙醇:向样品中加入与凝胶等体积的异丙醇并混匀。
5. 结合DNA:将混合液转移至QIAquick离心柱,离心或抽真空使DNA结合于膜上。
6. 额外清洗(可选):若DNA用于测序等敏感应用,可增加一步Buffer QG清洗以彻底去除杂质。
7. 洗涤:加入Buffer PE洗涤离心柱,离心去除残留的盐和杂质。
8. 残留去除:空离离心柱1分钟以彻底去除残余乙醇。
9. 洗脱:将离心柱置于洁净收集管中,向膜中央加入洗脱缓冲液或水,离心洗脱DNA。
10. 上样准备(可选):若需进行电泳分析,需将纯化后的DNA与上样缓冲液按比例混合。
五、注意事项
1. 结合pH:Buffer QG呈黄色表明pH≤7.5,此条件下DNA结合效率最佳,若溶胶后溶液变色需调整pH。
2. 缓冲液配制:使用前需按瓶身说明向Buffer PE中加入指定体积的无水乙醇。
3. 实验设备:实验需准备100%异丙醇及可维持50°C的加热块或水浴锅。
4. 离心条件:所有离心步骤均需在微型离心机中以17,900 x g的转速进行。
5. 敏感应用:若DNA将用于盐敏感实验,在Buffer PE洗涤后可将离心柱静置2-5分钟,并确保充分空离去除乙醇。
6. 洗脱优化:为获得更高浓度DNA,可减少洗脱体积或适当延长膜上孵育时间。
六、相关产品推荐
1. QIAquick核苷酸去除试剂盒(货号:28306):用于快速纯化磷酸化或标记的寡核苷酸,去除未掺入的核苷酸。
2. QIAprep Spin Miniprep试剂盒(货号:27106):用于从1-5 mL细菌培养液中快速小量抽提质粒DNA。
3. QIAamp DNA Mini Kit(货号:51306):用于从多种生物样本(如血液、组织、细胞)中纯化基因组DNA。