一、基本信息

产品名称：EZscript 快速逆转录试剂盒（含gDNA去除）

产品货号：EZB-RT2GQ / EZB-RT2GQ-L

规格：100/500 Rxns, 20 μl/Rxn

保存温度：-20°C产品描述：本产品为新一代快速逆转录试剂盒，整合了经特殊优化的高效gDNA去除系统与新型M-MLV突变体逆转录酶。其gDNA Remover可在室温下5分钟内高效降解超过95%的基因组DNA，显著降低基因组残留对后续检测的干扰。4x EZscript RT Mix II预混了逆转录所需全部组分，配合优化的反应体系，仅需15分钟即可完成高效逆转录，其产物量相当于传统AMV逆转录酶反应1小时的产出。逆转录产物适用于PCR及qPCR分析。

二、产品应用

本产品主要用于从总RNA模板快速合成第一链cDNA，适用于多种下游分子生物学应用。

△基因表达分析（qPCR）：为实时荧光定量PCR提供高质量cDNA模板。

△常规PCR扩增：为终点法PCR提供可靠的cDNA模板。

三、产品优势

✅高效去基因组：经特殊优化的DNase反应体系，可在室温5分钟内高效去除基因组DNA污染，保障结果特异性。

✅快速高效：采用新型M-MLV突变体逆转录酶与优化体系，15分钟逆转录效率相当于传统方法1小时。

✅操作简便：试剂预混分装，两步法操作流程简单，减少了移液步骤和操作误差。

✅抗干扰性强：逆转录酶具有优异的抗抑制剂能力，对部分降解或含有抑制物的RNA样本兼容性更好。

✅灵敏度高：最低可使用100 ng总RNA进行逆转录，适合微量样本分析。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：将gDNA Remover与4x EZscript RT Mix II从-20°C取出，解冻后轻柔颠倒混匀，短暂离心后置于冰上备用。

2. gDNA去除：在无菌离心管中，加入100 ng至2 μg总RNA、2 μl gDNA Remover，并用无核酸酶水补足至15 μl总体积。轻柔混匀后，室温（19-27°C）孵育5分钟。

3. 体系配制：向上述反应液中直接加入5 μl 4x EZscript RT Mix II。

4. 充分混匀：使用涡旋振荡器或移液器彻底混匀全部反应液，并短暂离心收集液滴。

5. 逆转录反应：将反应管置于PCR仪中，运行42°C 15分钟，随后95°C 30秒的反应程序。

6. 产物处理：反应结束后获得的cDNA可直接用于qPCR，或根据靶基因表达量稀释5-10倍后使用。未立即使用的cDNA建议于-80°C保存。

五、注意事项

1. 保存条件：所有组分需于-20°C保存，避免反复冻融，以保证试剂活性。

2. RNA质量：建议使用高完整性、无降解的RNA作为起始材料，以获得最佳逆转录效率。

3. 操作环境：实验全程需在无RNase污染的环境中进行，并使用无核酸酶的耗材。

4. 充分混匀：添加各组分后必须充分混匀，这是确保反应均一性和高效性的关键步骤。

5. 产物应用：本试剂盒合成的cDNA主要用于PCR及qPCR分析，不建议直接用于基因克隆实验。

6. 加样体积：配制gDNA去除反应时，总RNA溶液的体积不应超过13 μl。

六、相关产品推荐

1. 组织总RNA提取试剂盒（货号：EZB-RN001-plus）：采用离心柱法，可从多种动物组织中快速纯化高纯度总RNA。

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