一、基本信息

产品编号：B0005-plus

规格：50 Preps

产品描述：EZ-press microRNA Purification Kit PLUS是一款基于离心柱技术的核酸提取试剂盒，专门设计用于从多种生物样本（包括贴壁细胞、悬浮细胞及动物组织）中快速纯化包含microRNA在内的总RNA。该试剂盒通过优化的裂解体系和两步柱纯化流程，能有效去除基因组DNA污染，确保获得高纯度、高完整性的RNA产物，适用于下游的逆转录、实时荧光定量PCR等分子生物学应用。

二、产品应用

EZ-press microRNA Purification Kit PLUS适用于从多种样本中提取包含小分子RNA的总RNA，用于后续的分子生物学分析。

△细胞RNA提取：从贴壁或悬浮培养的哺乳动物细胞中高效分离总RNA。

△组织RNA提取：从动物组织（如内脏、胚胎、肿瘤）中提取总RNA，适用于易裂解组织类型。

△microRNA富集：特异性保留并纯化样本中的小分子RNA（如miRNA），确保其在下游检测中的回收率。

△基因组DNA去除：通过内置的DNA清除柱和柱上DNase消化步骤，有效去除残留的基因组DNA，减少对qPCR等实验的干扰。

三、产品优势

✅高效裂解：采用优化的裂解缓冲液，能迅速并完全地裂解细胞和组织，释放包括miRNA在内的各类RNA。

✅高纯度RNA：通过DNA清除柱和柱上DNase处理两步法，最大程度去除基因组DNA污染，获得高纯度的RNA。

✅操作便捷：流程设计简练，无需苯酚/氯仿抽提，大部分步骤在室温下进行，可在约30分钟内完成提取。

✅广泛兼容性：适用于多种起始材料，包括不同数量的细胞及多种类型的动物组织样本。

✅保持完整性：优化的结合与洗脱条件能有效回收小至microRNA的RNA分子，保持RNA的完整性。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样品裂解：根据样本类型（贴壁细胞、悬浮细胞或组织），使用适量裂解液对样品进行充分匀浆或裂解，对于组织样本需离心取上清。

2. 基因组DNA清除：将裂解液上清转移至DNA清除柱中离心，收集流出液以去除大部分基因组DNA及细胞碎片。

3. RNA结合：向流出液中加入指定体积的无水乙醇，混匀后转移至RNA结合柱离心，使RNA特异性吸附于柱膜。

4. DNase消化：将配制好的DNase混合液直接加至RNA结合柱的膜上，室温孵育以降解可能残留的微量DNA。

5. 洗涤：使用已添加乙醇的洗涤缓冲液清洗吸附柱，高速离心以彻底去除盐分、蛋白质等杂质。

6. 干燥：将吸附柱开盖室温静置片刻，以挥发残留的乙醇。

7. RNA洗脱：向膜中央加入无核酸酶洗脱缓冲液，室温静置后离心，将纯化的RNA洗脱收集。

五、注意事项

1. 试剂准备：首次使用前，务必按说明书要求向洗涤缓冲液瓶中加入指定体积的无水乙醇并混匀。

2. 操作温度：整个提取过程（直至获得洗脱液前）需在室温下进行，避免将吸附柱置于冰上，以防盐类沉淀堵塞柱膜。

3. 样本处理：对于组织样本，起始量建议不超过5毫克，过量组织可能导致裂解不充分或堵塞柱子；对于坚韧组织，建议选用专用试剂盒。

4. 防污染措施：建议将洗脱缓冲液等组分进行分装使用，操作中佩戴手套，使用无RNase的耗材，以防止RNA酶污染。

5. 洗脱体积：洗脱缓冲液用量不应少于20微升，以确保RNA充分溶解；可通过二次洗脱操作提高最终RNA产率。

6. RNA保存：洗脱得到的RNA应置于冰上，尽快测定浓度并进行后续实验，或于-80°C长期保存，避免反复冻融。

六、相关产品推荐

1. 通用型microRNA提取试剂盒（货号：EZB-miRN1）：专门用于从全血、血浆、血清等液体样本中高效提取microRNA。

2. 福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织RNA提取试剂盒（货号：EZB-RNF01）：适用于从FFPE组织切片中提取降解的RNA，兼容下游qPCR分析。