一、基本信息

产品编号：B0004DP

核心特点：快速高效、操作简便、室温操作

产品描述：EZ-press RNA Purification Kit是一种基于硅胶膜离心柱技术的总RNA提取试剂盒，专为从哺乳动物细胞样本中快速、高效地纯化高质量RNA而设计。该试剂盒优化了裂解和结合条件，无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂，也无需进行DNase消化步骤即可有效去除基因组DNA污染，可在30分钟内完成提取流程，所得RNA适用于多种下游应用。

二、产品应用

本试剂盒适用于从多种哺乳动物细胞样本中快速提取总RNA，适用于后续的RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、cDNA合成及芯片分析等。

△细胞培养研究：从贴壁或悬浮培养的细胞系中提取RNA。

△免疫学研究：从淋巴细胞、T细胞、B细胞等免疫细胞中提取RNA。

△基因表达分析：为实时荧光定量PCR等分子生物学实验提供高质量的RNA模板。

△样本保存：细胞裂解产物可在-80°C长期保存，便于后续批量处理。

三、产品优势

✅快速高效：整个提取流程可在约30分钟内完成，无需过夜消化或长时间孵育。

✅高纯度：优化的配方可有效去除蛋白质、基因组DNA等杂质，获得高纯度的RNA。

✅操作简便：基于离心柱的纯化方式，步骤精简，无需进行苯酚-氯仿抽提。

✅兼容性强：适用于多种类型的哺乳动物细胞，包括贴壁细胞、悬浮细胞及难裂解的免疫细胞。

✅室温操作：所有步骤均在室温下进行，避免了低温对裂解和结合效率的影响。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 细胞准备与裂解：对于贴壁细胞，弃培养基并用PBS清洗后，直接加入裂解液裂解；对于悬浮细胞或高密度贴壁细胞，需收集细胞沉淀后加入裂解液重悬裂解。可通过摇床孵育或轻柔吹打确保充分裂解。

2. 结合条件准备：向充分裂解的样品中加入等体积的无水乙醇，并充分混匀，以提供RNA与硅胶膜结合的最佳条件。

3. RNA结合：将样品与乙醇的混合物转移至提供的离心柱中，在一定离心力下离心，使RNA特异性结合到硅胶膜上，同时杂质被滤除。

4. 膜洗涤：向结合有RNA的离心柱中加入洗涤缓冲液并离心，以去除残留的蛋白质、盐分及其他有机杂质。

5. RNA洗脱：将离心柱短暂开盖晾干以去除残留乙醇，然后将洗脱缓冲液直接加至膜中央，室温静置后离心，将高纯度的RNA洗脱收集。

五、注意事项

1. 缓冲液配制：Wash Buffer在首次使用前，必须按说明书要求加入指定体积的无水乙醇并充分混匀。

2. 试剂保存：为减少污染风险，建议将Elution Buffer进行小份分装后使用。

3. 操作温度：整个RNA提取过程应在室温下完成，切勿将离心柱或裂解样品置于冰上，以免盐类沉淀影响纯化效率。

4. 细胞培养与处理：建议使用6孔板或35mm培养皿培养细胞至合适密度后进行裂解，避免使用过大培养皿导致裂解不充分或基因组DNA污染。

5. 裂解操作：裂解细胞时，应使用适当技巧进行吹打混匀，避免产生过多气泡，以确保裂解完全。充分裂解后的产物可于-80°C保存以备后续使用。

6. 洗脱操作：进行RNA洗脱时，需确保洗脱缓冲液准确加至硅胶膜的中心区域，并避免枪头触及或刺破滤膜，以保证RNA的完全洗脱和最大得率。

六、相关产品推荐

1. Tissue RNA Purification Kit PLUS（EZB-RN001-plus）：适用于从动物组织和细胞中提取高质量的总RNA。

2. Tissue RNA Purification Kit (for Adipose Tissue) （EZB-RN001A）：专门针对高脂肪、高蛋白等难处理动物组织进行优化，有效去除脂质干扰，获得更高纯度的RNA。